O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do fator de crescimento semelhante à insulin I (IGF-I) sobre alguns parâmetros seminais e fertilidade do sêmen ovino congelado-descongelado. Foram utilizados cinco carneiros (cinco ejaculados/carneiro) para coleta de sêmen e avaliação dos parâmetros seminais. Antes da criopreservação, os ejaculados foram divididos em quatro alíquotas e diluídos com Tris ou Tris suplementado com IGF-I humano (50, 100, ou 250 ng/mL). O sêmen foi avaliado imediatamente após a descongelação (T0), uma (T1) e duas horas (T2) após a incubação a 37oC. O percentual de viabilidade (Técnica de Fluorescência-calceína e ethidium), integridade de membrana e motilidade foram analisados, além do teste hiposmótico para avaliar a integridade da membrana. Para avaliar a fertilidade, a IA via laparoscópica foi realizada em 121 ovelhas para comparar a taxa de gestação da melhor concentração do IGF-I e do Tris sem suplemento. O diagnóstico de gestação foi realizado por ultra-sonografia transretal. Após uma e duas horas após a incubação, em todos os grupos, o percentual de espermatozoides móveis e a integridade de membrana diminuíram quando comparado ao sêmen no T0. A motilidade foi maior (P < 0,05) nos grupos IGF-I 100 e IGF-I 250 quando comparados aos grupos IGF-I 50 e Tris (76,2 e 74,4% versus 66,2 e 64,4%, respectivamente) no T0, após 1h (67 e 63,6% versus 56,2 e 54,7%) e 2 h pós-incubação (58,2 e 55,8% versus 48 e 47,2%). Além disso, a viabilidade foi maior (P < 0,05) nos grupos IGF-I 100 e IGF-I 250 do que nos grupos IGF-I 50 Tris (88,7 e 88,3% versus 76,6 e 77,6%, respectivamente) no T0. Entretanto, nenhuma diferença (P > 0,05) na integridade de membrana e teste hiposmótico foi observada entre os grupos. Nenhuma diferença (P > 0,05) na fertilidade foi observada entre os grupos IGF-I 100 e Tris. Em conclusão, o IGF-I melhorou a motilidade espermática e a integridade estrutural da membrana plasmática, entretanto sem

9 um efeito significante na taxa de gestação após a IA laparoscópica em ovelhas com sêmen congelado-descongelado. Palavra Chave: Sêmen congelado-descongelado; IGF-I; Ovino; Criopreservação; Inseminação artificial.

The objective was to evaluate the effects of insulin-like growth factor-I (IGF-I) on the quality and fertility of frozen/thawed ovine semen. Five rams (five ejaculates/ram) were used for evaluation of semen parameters. Before cryopreservation, ejaculates were divided into four aliquots and extended with Tris alone or supplemented with human IGF-I (50, 100, or 250 ng/mL). Semen was evaluated immediately after thawing (T0), after 1 h (T1) and 2 h (T2) post-incubation at 37 0C. The percentage of live cells (fluorescence analysis-calcein and ethidium), acrosome integrity (NAR) and motility were analyzed, and hypo-osmotic swelling tests (HOST) were used to evaluate membrane resistance. In addition, AI was performed using 121 ewes to compare the optimal concentration of IGF-I versus Tris alone on pregnancy rates after laparoscopic insemination. Pregnancy diagnosis was performed by transrectal ultrasonography. After 1 and 2 h post-incubation, in every group, percentage motile sperm, NAR and HOST decreased compared to semen at T0. Motility was higher (P < 0.05) in the IGF-I 100 and IGF-I 250 groups when compared to the IGF-I 50 and Tris groups (76.2 and 74.4% versus 66.2 and 64.4%, respectively) at T0, after 1 h (67 and 63.6% versus 56.2 and 54.7%) and 2 h post-incubation (58.2 and 55.8% versus 48 and 47.2%). Furthermore, viability was higher (P < 0.05) in the IGF-I 100 and IGF-I 250 groups than in the IGF-I 50 and Tris groups (88.7 and 88.3% versus 76.6 and 77.6%, respectively) at T0. There was no difference (P > 0.05) in NAR or HOST among groups. There were no differences (P > 0.05) in fertility between the IGF-I 100 and Tris groups. In conclusion, IGF-I improved subjective sperm motility and structural integrity of the plasma membrane without a significant effect on 45 d pregnancy rates after laparoscopic insemination of ewes with frozen-thawed semen. Keywords: Frozen-thawed sperm; IGF-I; Ovine; Semen cryopreservation; Artificial insemination.