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Repositório Institucional - UECE
Título:
Água de coco em pó (ACP-104) adicionada de crioprotetores sobre a morfometria da cabeça de espermatozóides de Pirapitinga (Piaractus brachypomus) pós-descongelamento

Autor(es):
Melo, Mônica Aline Parente

Palavras Chaves:
Não informado

Ano de Publicação:
2010

Resumo:
O objetivo do presente estudo foi avaliar a associação de diluentes e crioprotetores sobre a morfometria da cabeça de espermatozóides de Pirapitinga (Piaractus brachypomus) pós-descongelação em relação ao sêmen fresco. Trinta machos de Pirapitinga foram hipofisados 14 horas antes da coleta do sêmen. Uma alíquota de cada amostra seminal válida foi fixada para análise da morfometria e o restante constituiu o pool que foi dividido em três partes. A primeira parte foi criopreservada em ACP-104 ou Ringer adicionados de 10% de Dimetilsulfóxido (DMSO) ou 10% de Metilglicol (MG), com taxa de diluição de 1:4 ou 1:6 (sêmen:diluente) e acondicionadas em palhetas francesas de 0,5 mL. A segunda, juntamente com as amostras individuais de cada animal, foi fixada para posterior análise morfométrica. A terceira foi transportada ao laboratório em isopor a 4ºC para análises de motilidade objetiva pós-ativação. Todas as análises foram realizadas com o auxílio do software Sperm Class Analyzer. Após 45 dias, as palhetas foram descongeladas e os espermatozóides foram avaliados em relação à motilidade e morfometria. Os dados foram submetidos à Análise de Variância e a motilidade foi comparada através do teste de Kruskal-Wallis. Os dados morfométricos foram comparados entre os tratamentos através do teste SNK e com o controle pelo teste de Dunnett (p<0,05), sendo expressos em média e desvio padrão. Após a descongelação, todos os tratamentos apresentaram motilidade significativamente inferior ao controle, e as amostras criopreservadas com ACP-104 apresentaram motilidade significativamente superior às amostras criopreservadas com Ringer. Em relação à morfometria da cabeça dos espermatozóides frescos, estes apresentaram comprimento de 3,3784±0,132μm, largura 2,3391±0,075μm, área 7,3130±0,386μm 2 , perímetro 9,7249±0,332μm, elongação 0,1843±0,018, elipticidade 1,4592±0,055, regularidade 0,8536±0,009 e rugosidade 0,9589±0,027. Após a criopreservação, não foi observada influência da taxa de diluição utilizada em nenhum dos parâmetros avaliados, além disso, as amostras criopreservadas com Ringer apresentaram área, perímetro, largura e comprimento similares ao controle. Também não houve diferenças significativas dos efeitos testados sobre as variáveis regularidade e rugosidade (p>0,05). As amostras criopreservadas com ACP-104 apresentaram medidas significativamente superiores de comprimento e perímetro que as criopreservadas com Ringer. Com relação à largura e conseqüentemente à área, as amostras criopreservadas com ACP-104 8 apresentaram medidas significativamente superiores ao controle e às amostras criopreservadas com Ringer. Houve uma redução significativa da elipticidade e elongação em todos os tratamentos pós-descongelação em relação ao controle. Além disso, as amostras criopreservadas com ACP-104 apresentaram uma redução significativa desses dois parâmetros em relação às amostras criopreservadas com Ringer. Conclui-se que, diante de uma melhor motilidade espermática e maior alteração de cabeça pós-descongelação, provavelmente, a criopreservação com ACP-104 tornou os espermatozóides mais adaptados a sobreviver em condições desfavoráveis. Esse trabalho foi aprovado pelo CEUA (Comitê de Ética para o Uso de Animais da Universidade Estadual do Ceará) com protocolo número 09230730-2. Palavras-chave: Peixe. Sêmen. Análise Seminal Auxiliada por Computador.

Abstract:
This study was designed to evaluate the association of extenders and cryoprotectants on the sperm head morphometry of Pirapitinga (Piaractus brachypomus) after thawing compared to fresh semen. Thirty Pirapitinga males were hypophysed 14 hours before semen collection. One aliquot of each seminal sample valid was fixed for morphometric analysis and the remainder formed the pool which was divided into three parts. The first part was frozen in PCW-104 or Ringer added 10% of Dimethyl sulfoxide (DMSO) or 10% of methylglycol (MG) with a dilution rate of 1:4 or 1:6 (semen: extender) and filled into 0.50 mL straws. The second, together with individual samples from each animal, was fixed for subsequent morphometric analysis. The third was transported to the laboratory in styrofoam at 4 ° C for analysis of objective motility post-activation. All analysis was carried out using the software Sperm Class Analyzer. After 45 days, the straws were thawed and sperm were assessed for motility and morphology. The data were submitted to ANOVA and motility was compared using the Kruskal-Wallis. Morphometric data were compared between treatments using the SNK test and the control by Dunnett test (p<0.05), expressed as mean and standard deviation. After thawing, all treatments had significantly lower motility compared to the control, and the samples preserved in PCW-104 had significantly higher motility compared to those preserved in Ringer (p<0.05). Related to sperm head morphometry of fresh semen, the means values were: length 3.3784±0.132μm, width 0.075±2.3391μm, area 0.386±7.3130μm 2 , perimeter 9.7249±0.332μm, elongation 0.1843±0.018, ellipticity 0.055±1.4592, regularity 0.8536±0.009 and roughness 0.9589±0.027. After cryopreservation, there was no influence of dilution rate used in any of the parameters evaluated, in addition, the samples preserved in Ringer showed area, perimeter, length and width similar to control. There were also no significant differences in the effects on the variables regularly and roughness (p> 0.05). The samples cryopreserved in PCW104 had significantly higher measures of length and perimeter that preserved in Ringer (p<0.05). Respect to the width and consequently the area, samples cryopreserved in PCW-104 were significantly superior to the control measures and to the samples preserved in Ringer (p<0.05). There was a significant reduction in the ellipticity and elongation in all treatments after thawing as compared to control (p<0.05). In addition, samples cryopreserved in PCW-104 showed a significant reduction of these two parameters compared to samples preserved in Ringer (p<0.05). It can be conclude that, with a better sperm motility and greatest change in head after thawing, probably, cryopreservation in PCW-104 made the sperm more adapted to survive in unfavorable conditions. This study was approved by CEUA (Ethics Committee for Animal Use of the Ceará State University) with protocol number 09230730-2. Keywords: Fish. Semen. Computer-assisted Semen Analysis.

Tipo do Trabalho:
Dissertação

Referência:
Melo, Mônica Aline Parente. Água de coco em pó (ACP-104) adicionada de crioprotetores sobre a morfometria da cabeça de espermatozóides de Pirapitinga (Piaractus brachypomus) pós-descongelamento. 2010. 63 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2010) - Universidade Estadual do Ceará, , 2010. Disponível em: Acesso em: 1 de maio de 2024

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