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Repositório Institucional - UECE
Título:
EFEITO DE AGENTES CRIOPROTETORES NO RESFRIAMENTO DEEMBRIÕES DE MACROBRACHIUM AMAZONICUM

Autor(es):
LUCAS, CAROLINE COSTA

Palavras Chaves:
Não informado

Ano de Publicação:
2015

Resumo:
RESUMO
As técnicas de criopreservação vêmsendo amplamente utilizadasvisando apreservação de tecidos
e células em quiescência para o retorno ao metabolismo normal.Existem poucos relatos de
criopreservação em embriões de Macrobrachiumamazonicum, assim como as injúrias que este
processo pode causar durante o desenvolvimento embrionário. Diante disso, o objetivo deste
trabalho foi analisar os efeitos dos agentes crioprotetores e do resfriamento no estádio VIII desta
espécie. Fêmeas ovígeras tiveram seus ovos e embriões retiradosda câmara incubadora e pesados
(0,01 g), em seguida foramcolocados em tubos Falcon® com solução crioprotetora e solução
salina livre de cálcio.Os ovos e embriões foramlevados para caixas térmicas e resfriados a5 °C
por duas horas, ao término, foram lavados em água corrente e transportados para incubadoras,
onde permaneceram por 24 horas.Uma alíquota foi fixada com formol 4% e, em seguida passou
pelo processo de histologia clássica, com cortes de3 μm de espessura e analisada em microscópio
Leica DM 2000. Outra alíquota foi utilizada para a avalição biométrica, em que comprimento,
largura e volume foram medidos e analisados em microscópio estereoscópico Leica DFC
295,utilizando o programa LAS V3.6. Os agentes crioprotetores utilizados foram:
dimetilsulfóxido (1, 5 e 10 %), álcool metílico (1, 5 e 10 %), etilenoglicol (1, 5 e 10 %) e
sacarose (0,5 M). Foi realizada análise de variância seguida do teste Tukey, com nível de
significância de 5%. Odimetilsulfóxido (DMSO) foi o crioprotetor que menos afetou a
sobrevivência dos embriões com taxas de 71,8%, 36,2%e 0% para as concentrações de 1%, 5% e
10%, respectivamente. O etilenoglicol causou 100% de mortalidade em todas as concentrações
utilizadas. No tratamento com DMSO 10% foram observadas as menores medidas para
comprimento e volume, comparado com as outras concentrações de DMSO utilizadas. Os ovos
resfriados em álcool metílico 10% tiveram as menores medidas para comprimento, largura e
volume.Não foi observada diferença estatística significativa no comprimento dos ovos resfriados
nas três concentrações de etilenoglicol. Não foi possível observar nesse trabalho a interferência
do resfriamento e dos crioprotetores utilizados sobre as estruturas embrionárias
Palavras-chave: Criopreservação. Crioinjúrias. Camarão-da-Amazônia.

Abstract:
ABSTRACT
The cryopreservation techniques have been widely used with the intention of preserving tissues
and cells in quiescence for the return to normal metabolism. There are few reports of
cryopreservation Macrobrachiumamazonicum embryos, as well as injuries that this process can
cause during embryonic development. Thus, the aim of this study was to analyze the effects of
cryoprotectants agents and cooling in stage VIII of this species. Ovigerous female’s eggs
andembryos were removed from the incubator chamber and weighed (0.01g), then were placed in
Falcon® tubes with cryoprotectant solution and saline-free calcium solution. Eggs and embryos
were in ice coolers and cooled to 5 °C then were stored for a period of two hours, at the end, were
washed with tap water to remove the ACP and acclimated for 5 minutes in water at room
temperature and then transferred to 50 ml incubators, where they remained for 24 hours. An
aliquot was fixed with 4% formaldehyde and then passed through the histology procedure with 3
mm thick sections, stainded with hematoxylin/eosin and analyzed in a Leica DM 2000. Another
aliquot was used for biometric analyse, where length, width and volume were measured and
analyzed in stereoscopic microscope Leica DFC 295, using the LAS program V3.6. The
cryoprotectants agents used were: dimethylsulfoxide (1, 5 and 10%), methyl alcohol (1, 5 and
10%), ethylene glycol (1, 5 and 10%) and sucrose (0.5 M). Variance analysis was used, followed
by the Tukey test at 5% significance level. The dimethylsulfoxide (DMSO) cryoprotector was
affected less embryo survival with rates of 71.8%, 36.2% and 0% for concentrations of 1%, 5%
and 10%, respectively. The ethylene caused 100% mortality at all the concentrations used.
Treatment with 10% DMSO were observed minor measures to length and volume, compared
with other DMSO concentrations used. Colds eggs to methyl alcohol 10% had lower measures
for length, width and volume. There was no statistically significant difference in the length of
colds eggs in the three ethylene glycol concentrations. It was not possible to observe this work
interference cooling and cryoprotectants used on embryonic structures
Palavras-chave: Cryopreservation. Cryonjuries. Amazonriverprawn.

Tipo do Trabalho:
Dissertação

Referência:
LUCAS, CAROLINE COSTA. EFEITO DE AGENTES CRIOPROTETORES NO RESFRIAMENTO DEEMBRIÕES DE MACROBRACHIUM AMAZONICUM. 2015. 50 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2015) - Universidade Estadual do Ceará, , 2015. Disponível em: Acesso em: 5 de maio de 2024

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