Efeitos da leucina sobre o desequilíbrio redox em ratos diabéticos induzidos por estreptozotocina no período neonatal
Autor(es):
Pontes, Edivânia Oliveira Bezerra
Palavras Chaves:
Não informado
Ano de Publicação:
2015
Resumo:
RESUMO O Diabetes Mellitus (DM) é uma doença crônica, caracterizado por um estado hiperglicêmico causado por problemas na secreção e/ou ação da insulina, classificada em DM1 e DM2. Dentre as complicações que advêm do DM, temos a neuropatia diabética, a retinopatia e a nefropatia. O DM aumenta a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), espécies reativas de nitrogênio (ERNs) e uma redução nas enzimas antioxidantes. O músculo esquelético é uma fonte de EROs e ERNs tanto em condições fisiológicas como patológicas. Vários modelos experimentais são utilizados para estudar a fisiopatologia e as complicações advindas do DM. A leucina é um aminoácido essencial de cadeia ramificada que possui extrema importância na síntese de proteínas, estudos mostraram que a administração de leucina é capaz de aumentar a sensibilidade insulínica, melhorar a tolerância à glicose e a aumentar a oxidação de ácidos graxos pelo musculo esquelético. Portanto, o presente estudo buscou avaliar a capacidade da Leucina em melhorar o quadro de estresse oxidativo em animais diabéticos induzidos por STZ no período Neonatal. Para o estudo, foram utilizados ratos machos Wistar, provientes do Biotério do Instituto Superior de Ciências Biomédicas da UECE, sendo mantido no ciclo claro/escuro (12h/12h) e em ambiente com temperatura entre 22 a 25°C e com água e ração ad libitum. Os animais do grupo Controle (C) receberam apenas veículo citrato no 5º dia de vida, e o grupo Diabético não suplementado (D) e diabético suplementado com Leucina (DL), receberam uma dose única de STZ no 5º dia de vida. A administração de Leucina (24g/kg) foi realizada duas vezes ao dia a partir da 4ª semana de vida do animal. Na 12ª semana os animais foram sacrificados anestesiados (Sódio pentobarbital 4mg/100g p.c) após 8 a 12 horas de jejum prévio e eutanasiados por decapitação, e retirado o musculo esquelético (Gastrocnêmio). Para a analise do tecido foi realizado a extração da proteína, quantificação pelo método de BRADFORD. Foi realizado o método de TBARS, a Determinação de Nitrito e a atividade de Catalase (CAT) e Superóxido Desmustase (SOD). Os dados foram tratados através do software GraphPadPrism® versão 5.0. As diferenças foram consideradas significantes quando p<0,05. O Trabalho foi aprovado sob parecer n° 12775097-5 CEUA/UECE. Os valores de MDA no grupo D foram elevados, o grupo DL conseguiu reverter aos valores do grupo C. A concentração de Nitrito foi reduzida no grupo D, e o grupo DL aumentou esses valores ao padrão do grupo C. A Atividade de CAT foi aumentada no grupo DL, entretanto, não houve redução no grupo D. Não encontramos diferença significativa na atividade de SOD. A suplementação com Leucina promove efeitos benéficos relevantes que poderiam contribuir na redução do quadro de estresse oxidativo no Diabetes Mellitus, pela redução dos níveis de MDA, aumento nos níveis de Nitrito e aumento da atividade da CAT. Palavras-chave: Diabetes Mellitus. Estresse Oxidativo. Leucina.
Abstract:
ABSTRACT Diabetes Mellitus (DM) is a chronic disease, characterized by a hyperglycemic state caused by problems in the secretion and / or action of insulin, classified into DM1 and DM2. Among the complications of this condition, we have diabetic neuropathy, retinopathy and nephropathy. The DM increases production of reactive oxygen and nitrogen species (ROS, RNS) and decreases the antioxidant enzymes. Skeletal muscle is a source of ROS and RNS both in physiological and pathological conditions. Several experimental models are used to study the pathophysiology and complications from diabetes. Leucine is na branched-chain amino acids which has extremely important on the synthesis of the proteins. Studies have shown that leucine administration would be able to increase insulin sensitivity, improve glucose tolerance and increase the oxidation of fatty acids in skeletal muscle. Therefore, this study aimed to evaluate the capacity of Leucine in improving oxidative stress in streptozotocin-induced diabetic animals in the neonatal period. For the study were used Wistar male rats from the vivarium at the Institute of Biomedical Sciences of State University of Ceará (UECE), were mantained in the light/dark cycle (12h/12h) and at a temperature between 22-25 ° C and with water and feed ad libitum. The animals of the control group (C) received only citrate vehicle on the 5th day of life, and the diabetic group untreated (D) and diabetic treated with Leucine (DL) received a single dose of STZ on the 5th day of life. Administration of leucine (24g / kg) was administered twice a day from the 4th week of life of the animal. At 12 weeks, after 8 to 12 hours of fasting, the animals were sacrificed. Firstly, the animals were anaesthetised (sodium pentobarbital 4mg/100g bw) and euthanized by decapitation, and removed the skeletal muscle (gastrocnemius). Second, the protein quantification of the tissue was analysed by Bradford method. After that, was carried out the TBARS method and the determination of nitrite, catalase (CAT) and superoxide desmustase (SOD) activity. The data were analyzed by GraphPadPrism® version 5.0 software. Differences were considered significant when p <0.05. The work was approved (number 12775097-5 CEUA / UECE). The MDA values in group D were higher and the DL group was able reverse the values for the group C. The concentration of nitrite was reduced in Group D, and DL group increased these values to the group C. The CAT activity was increased in the DL group, however, there was not reduction in group D. We found no significant differences in SOD activity. Supplementation with Leucine promotes significant beneficial effects that could contribute to the reduction of oxidative stress in DM by the reduction of the MDA levels and increased nitrite levels and CAT activity. Key-words: Diabetes Melittus. Oxidative stress. Leucine
Tipo do Trabalho:
TCC
Referência:
Pontes, Edivânia Oliveira Bezerra. Efeitos da leucina sobre o desequilíbrio redox em ratos diabéticos induzidos por estreptozotocina no período neonatal. 2015. 41f f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em 2015) – Universidade Estadual do Ceará, , 2015. Disponível em: Acesso em: 12 de maio de 2024
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