Avaliação da morfologia e viabilidade de folículos pre-antrais ovinos após criopreservação e cultivo in vitro de curta duração
Autor(es):
Gonçalves, Raphael Fernando Braga
Palavras Chaves:
Não informado
Ano de Publicação:
2011
Resumo:
A criopreservação de tecido ovariano tem como principal objetivo a manutenção deste tecido para sua posterior utilização, garantindo a preservação do material biológico de mulheres e fêmeas de animais de alto valor genético. Embora a criopreservação de tecido ovariano seja extensamente estudada, diversos pontos ainda necessitam ser elucidados, como a definição da concentração e tempo de exposição do agente crioprotetor a ser utilizado. Além disso, ainda não foram obtidos resultados satisfatórios relacionados ao cultivo in vitro de tecido ovariano previamente criopreservado. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivos definir um protocolo eficiente para a criopreservação de tecido ovariano ovino utilizando o propanodiol (PROH) como agente crioprotetor e avaliar o tecido ovariano previamente criopreservado após cultivo in vitro de curta duração. Para tanto, o tecido ovariano foi fragmentado e exposto (5, 10 ou 20 minutos) e/ou congelado utilizando PROH em duas diferentes concentrações (1,0 ou 1,5 M). Os fragmentos de cada tratamento foram submetidos à avaliação da morfologia folicular por Histologia Clássica e à análise de viabilidade pela utilização do corante Azul de Tripan. Em seguida, após a definição do protocolo mais adequado (melhor tempo de exposição e concentração de PROH), foi realizado o cultivo in vitro do tecido ovariano por 2 ou 4 horas para posterior análise da morfologia e viabilidade folicular conforme descrito anteriormente. Os dados obtidos foram analisados por ANOVA seguida dos testest de Student e SNK, para verificar as diferenças entre os percentuais de folículos morfologicamente normais, ou do teste do Qui-Quadrado, para identificar diferenças nos percentuais de folículos viáveis. Os resultados obtidos demonstraram que a exposição por 5 minutos seguida de criopresevação do tecido em solução de 1,5 M de PROH garantiu um percentual de folículos viáveis semelhantes ao tecido fresco (P>0,05). Durante o período de cultivo in vitro, os folículos apresentaram uma redução significativa (P<0.05) na percentagem de folículos normais e viáveis em comparação ao tecido fresco. Assim, o presente trabalho concluiu que é possível criopreservar eficientemente o tecido ovariano ovino utilizando 1,5 M de PROH e exposição por 5 minutos, embora ocorra uma redução gradual na qualidade folicular do tecido criopreservado submetido a curtos períodos de cultivo in vitro. Palavras-chave: Criopreservação, Cultivo in vitro, PROH, Tecido ovariano, Ovinos.
Abstract:
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Tipo do Trabalho:
Dissertação
Referência:
Gonçalves, Raphael Fernando Braga. Avaliação da morfologia e viabilidade de folículos pre-antrais ovinos após criopreservação e cultivo in vitro de curta duração. 2011. 62 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2011) - Universidade Estadual do Ceará, , 2011. Disponível em: Acesso em: 3 de maio de 2024
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