Efeito do ácido ascórbico sobre a sobrevivência e crescimento in vitro de folículos pré-antrais isolados caprinos
Autor(es):
Silva, Gerlane Modesto da
Palavras Chaves:
Não informado
Ano de Publicação:
2011
Resumo:
O presente estudo teve como objetivo investigar a influência de duas concentrações de
ácido ascórbico na sobrevivência, crescimento, formação antral e expressão de RNAm
para a metaloproteinase da matriz-9 (MMP-9) e seu inibidor tecidual-2 (TIMP-2) em
folículos ovarianos pré antrais caprinos (FOPA) durante cultivo de longa duração.
FOPA isolados foram individualmente cultivados na ausência ou presença de ácido
ascórbico nas concentrações de 50 µg/ml (AA50) ou 100 µg/ml (AA100) durante 18
dias. Os parâmetros avaliados foram viabilidade folicular, crescimento, formação de
antro e extrusão oocitária. O RNAm para a MMP-9 e TIMP-2 foi quantificado por
reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR) após 18 dias de cultivo no meio
controle (MEM+
) ou adicionado de ácido ascórbico (50 ou 100 g/ml) e no controle
fresco (não cultivado). No final do período de cultivo, AA50 aumentou
significativamente o percentual de folículos viáveis quando comparado aos demais
tratamentos. Além disso, a média de diâmetro folicular diário (µm/dia) foi
significativamente superior na presença de ambas as concentrações de ácido ascórbico
do que no MEM+
sozinho. Altas taxas de formação antral e baixas percentagens de
oócitos extrusos foram observadas no meio contendo AA50 quando comparado ao meio
controle. Os ensaios de qPCR em tempo real mostraram que o AA50 aumentou
significativamente a expressão de RNAm para MMP-9 comparado com o controle
fresco e o MEM+ sozinho. Em conclusão, o ácido ascórbico mantém a sobrevivência e
estimula o desenvolvimento de FOPA caprinos após cultivo in vitro. Além disso, este
antioxidante influenciou a expressão de RNAm para as enzimas MMP-9 e TIMP-2,
envolvidas com o remodelamento da membrana basal. Palavras-chave: MMP-9. TIMP-2. Antioxidantes. qPCR.
Abstract:
The present study aims to investigate the influence of two concentrations of ascorbic
acid on the survival, growth, antral formation and mRNA expression of the matrix
metalloproteinases-9 (MMP-9) and their tissue inhibitor-2 (TIMP-2) on caprine ovarian
preantral follicles (FOPA) during long-term in vitro culture. Isolated preantral follicles
were individually cultured without or with ascorbic acid at 50 µg/ml (AA50) or 100
µg/ml (AA100) during 18 days. The parameters evaluated were follicular viability,
growth, antrum formation and extruded oocytes. The mRNA expression of the genes
MMP-9 and TIMP-2 were quantified by real-time polymerase chain reaction (qPCR)
after 18 days of culture in the control medium (MEM+
) or ascorbic acid (50 or 100
g/ml) and in fresh control (non cultured). At the end of culture, AA50 significantly
increased the percentage of viable follicles compared with other treatments. Moreover,
mean daily increase in follicular diameter (µm/day) was significantly higher in the
presence of both concentrations of ascorbic acid than in MEM+
alone. Higher rates of
antral formation and lower percentages of extruded oocytes were observed in medium
containing AA50 compared with control medium. qPCR assays showed that AA50
increases MMP-9 mRNA expression significantly compared with fresh control and
MEM+ alone. In conclusion, ascorbic acid maintains the survival and stimulates the
development of caprine FOPA after in vitro culture. In addition, this antioxidant has
influenced the expression of mRNA for the enzymes MMP-9 and TIMP-2, involved in
remodeling of the basement membrane.
Keywords: MMP-9. TIMP-2. Antioxidants. qPCR.
Tipo do Trabalho:
Dissertação
Referência:
Silva, Gerlane Modesto da. Efeito do ácido ascórbico sobre a sobrevivência e crescimento in vitro de folículos pré-antrais isolados caprinos. 2011. 100 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2011) - Universidade Estadual do Ceará, , 2011. Disponível em: Acesso em: 3 de maio de 2024
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