Utilização do hormônio folículo estimulante (FSH) homeopático no cultivo in vitro de folículos pré-antrais ovinos inclusos em fragmentos de tecido ovariano
Autor(es):
Lima, Laritza Ferreira de
Palavras Chaves:
Não informado
Ano de Publicação:
2011
Resumo:
Diversas biotecnologias estão sendo utilizadas nos ovinos com objetivo de melhorar a
produção de embriões, dentre as quais podemos destacar a biotécnica de Manipulação
de Oócitos Inclusos em Folículos Ovarianos Pré-Antrais. Entretanto, a literatura mostra
que a MOIFOPA tem uma baixa eficiência para obtenção de embriões, além de um alto
custo, sendo necessário o uso de alternativas, como por exemplo, a homeopatia. O
objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do hormônio folículo estimulante
homeopático (FSHd) sobre a viabilidade, ativação e crescimento in vitro de folículos
ovarianos pré-antrais ovinos. Para tanto, fragmentos de córtex ovariano foram
cultivados por 1 ou 7 dias (39ºC em estufa; 5% de CO2 em ar) em α-MEM
suplementado na ausência ou presença de FSHd ( dinamizado 6, 12, ou 30 vezes em
álcool) ou álcool (Al) adicionados em diferentes intervalos (24 ou 48h). Antes e após o
cultivo, os folículos pré-antrais foram analisados utilizando histologia clássica,
microscopia eletrônica de transmissão e de fluorescência, e classificados em
primordiais, transição, primários e secundários, bem como em normais ou atrésicos.
Após 7 dias de cultivo, todos os tratamentos testados reduziram significativamente a
porcentagem de folículos morfologicamente normais quando comparados ao tecido
fresco (controle), exceto o tratamento FSHd6 após um dia de cultivo (P<0,05). Além
disso, quando comparados ao α-MEM sozinho, somente os tratamentos FSHd6 24h,
FSHd12 24h e 48h apresentaram percentuais de folículos normais superiores (P>0,05).
Após 1 e 7 dias de cultivo, todos os tratamentos um aumento significativo na
percentagem de folículos em desenvolvimento quando comparados ao controle fresco
(P>0,05). Já em relação ao α-MEM, após 7 dia de cultivo, somente o tratamento FSHd6
24 e 48h diferiu do α-MEM (P>0,05). No tocante ao diâmetro folicular e oocitário,
foram observados aumentos significativos somente no tratamento Al 24h e FSHd6 24h
após 7 dias de cultivo quando comparado ao controle (P>0,05). As análises
ultraestrutural e de fluorescência confirmaram a integridade dos folículos cultivados na
presença de FSH dinamizado após 7 dias de cultivo. Desta forma, o presente estudo
mostrou evidências que o FSHd6 24h atua sobre a foliculogênese inicial em ovelhas,
uma vez que promoveu o crescimento in vitro e manteve a viabilidade de folículos pré-antrais.
Palavras-chave: Cultivo in vitro. Folículos ovarianos. Homeopatia. FSH.
Abstract:
Several biotechnology are being used in sheep to improve the production of embryos, of
which manipulation of oocytes enclosed in preantral follicles (MOEPF). However, the
literature shows that MOEPF has a low efficiency to obtain embryos, a high cost, and
required the use of alternatives such as homeopathy. The aim of this study was to
evaluate the effect of dynamized follicle-stimulating hormone (dFSH) on the viability,
activation and in vitro growth of ovarian preantral follicles in sheep. For this purpose,
slices of ovarian cortex were cultured for 1 or 7 days (39 ° C in incubator, 5% CO2 in
air) in supplemented α-MEM in the absence or presence of dFSH (6, 12, or 30 times in
alcohol) or alcohol (Al) added in different intervals (24 or 48 hours). Before and after
culture, the preantral follicles were analyzed using classical histology, transmission
electron microscopy and fluorescence microscopy, and follicles were classified as
primordial, intermediate, primary and secondary, as well as normal or atretic. After 7
days of culture, all treatments significantly reduced the percentage of morphologically
normal follicles when compared to the tissue fresh (control), except FSHd6 treatment
after 1 day of culture (p<0.05). When compared to α-MEM alone, only FSHd6 24h,
FSHd12 24h and 48h showed higher percentages of normal follicles (p<0.05). After 1
and 7 days of culture, all treatments showed a significant reduction in the percentage of
primordial follicles with a concomitant increase in the percentage of developing
follicles when compared to the fresh control (p<0.05). Compared to α-MEM, after 1 day
of culture, all treatments significantly reduced the percentage of primordial follicles, but
after 7 days, only FSHd6 24 and 48h reduced the number of these follicles (p<0.05).
Concerning the follicle and oocyte diameters, significant increases were observed only
in Al and FSHd6 treatments (with addition every 24 h) after 7 days of culture when
compared to the control, α-MEM and the other treatments (p<0.05). The ultrastructural
and fluorescence analyses confirmed the integrity of the follicles cultured in the
presence of dynamized FSH after 7 days of culture. Thus, this study showed evidences
that FSHd6 added every 24 acts on the initial folliculogenesis in sheep, since it
promoted the in vitro growth of preantral follicles and the maintenance of their viability.
Keywords: In vitro culture. Ovarian follicles. Homeopathy. FSH.
Tipo do Trabalho:
Dissertação
Referência:
Lima, Laritza Ferreira de. Utilização do hormônio folículo estimulante (FSH) homeopático no cultivo in vitro de folículos pré-antrais ovinos inclusos em fragmentos de tecido ovariano. 2011. 120 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2011) - Universidade Estadual do Ceará, , 2011. Disponível em: Acesso em: 26 de abril de 2024
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