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Repositório Institucional - UECE
Título:
Utilização do hormônio folículo estimulante (FSH) homeopático no cultivo in vitro de folículos pré-antrais ovinos inclusos em fragmentos de tecido ovariano

Autor(es):
Lima, Laritza Ferreira de

Palavras Chaves:
Não informado

Ano de Publicação:
2011

Resumo:
Diversas biotecnologias estão sendo utilizadas nos ovinos com objetivo de melhorar a produção de embriões, dentre as quais podemos destacar a biotécnica de Manipulação de Oócitos Inclusos em Folículos Ovarianos Pré-Antrais. Entretanto, a literatura mostra que a MOIFOPA tem uma baixa eficiência para obtenção de embriões, além de um alto custo, sendo necessário o uso de alternativas, como por exemplo, a homeopatia. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do hormônio folículo estimulante homeopático (FSHd) sobre a viabilidade, ativação e crescimento in vitro de folículos ovarianos pré-antrais ovinos. Para tanto, fragmentos de córtex ovariano foram cultivados por 1 ou 7 dias (39ºC em estufa; 5% de CO2 em ar) em α-MEM suplementado na ausência ou presença de FSHd ( dinamizado 6, 12, ou 30 vezes em álcool) ou álcool (Al) adicionados em diferentes intervalos (24 ou 48h). Antes e após o cultivo, os folículos pré-antrais foram analisados utilizando histologia clássica, microscopia eletrônica de transmissão e de fluorescência, e classificados em primordiais, transição, primários e secundários, bem como em normais ou atrésicos. Após 7 dias de cultivo, todos os tratamentos testados reduziram significativamente a porcentagem de folículos morfologicamente normais quando comparados ao tecido fresco (controle), exceto o tratamento FSHd6 após um dia de cultivo (P<0,05). Além disso, quando comparados ao α-MEM sozinho, somente os tratamentos FSHd6 24h, FSHd12 24h e 48h apresentaram percentuais de folículos normais superiores (P>0,05). Após 1 e 7 dias de cultivo, todos os tratamentos um aumento significativo na percentagem de folículos em desenvolvimento quando comparados ao controle fresco (P>0,05). Já em relação ao α-MEM, após 7 dia de cultivo, somente o tratamento FSHd6 24 e 48h diferiu do α-MEM (P>0,05). No tocante ao diâmetro folicular e oocitário, foram observados aumentos significativos somente no tratamento Al 24h e FSHd6 24h após 7 dias de cultivo quando comparado ao controle (P>0,05). As análises ultraestrutural e de fluorescência confirmaram a integridade dos folículos cultivados na presença de FSH dinamizado após 7 dias de cultivo. Desta forma, o presente estudo mostrou evidências que o FSHd6 24h atua sobre a foliculogênese inicial em ovelhas, uma vez que promoveu o crescimento in vitro e manteve a viabilidade de folículos pré-antrais. Palavras-chave: Cultivo in vitro. Folículos ovarianos. Homeopatia. FSH.

Abstract:
Several biotechnology are being used in sheep to improve the production of embryos, of which manipulation of oocytes enclosed in preantral follicles (MOEPF). However, the literature shows that MOEPF has a low efficiency to obtain embryos, a high cost, and required the use of alternatives such as homeopathy. The aim of this study was to evaluate the effect of dynamized follicle-stimulating hormone (dFSH) on the viability, activation and in vitro growth of ovarian preantral follicles in sheep. For this purpose, slices of ovarian cortex were cultured for 1 or 7 days (39 ° C in incubator, 5% CO2 in air) in supplemented α-MEM in the absence or presence of dFSH (6, 12, or 30 times in alcohol) or alcohol (Al) added in different intervals (24 or 48 hours). Before and after culture, the preantral follicles were analyzed using classical histology, transmission electron microscopy and fluorescence microscopy, and follicles were classified as primordial, intermediate, primary and secondary, as well as normal or atretic. After 7 days of culture, all treatments significantly reduced the percentage of morphologically normal follicles when compared to the tissue fresh (control), except FSHd6 treatment after 1 day of culture (p<0.05). When compared to α-MEM alone, only FSHd6 24h, FSHd12 24h and 48h showed higher percentages of normal follicles (p<0.05). After 1 and 7 days of culture, all treatments showed a significant reduction in the percentage of primordial follicles with a concomitant increase in the percentage of developing follicles when compared to the fresh control (p<0.05). Compared to α-MEM, after 1 day of culture, all treatments significantly reduced the percentage of primordial follicles, but after 7 days, only FSHd6 24 and 48h reduced the number of these follicles (p<0.05). Concerning the follicle and oocyte diameters, significant increases were observed only in Al and FSHd6 treatments (with addition every 24 h) after 7 days of culture when compared to the control, α-MEM and the other treatments (p<0.05). The ultrastructural and fluorescence analyses confirmed the integrity of the follicles cultured in the presence of dynamized FSH after 7 days of culture. Thus, this study showed evidences that FSHd6 added every 24 acts on the initial folliculogenesis in sheep, since it promoted the in vitro growth of preantral follicles and the maintenance of their viability. Keywords: In vitro culture. Ovarian follicles. Homeopathy. FSH.

Tipo do Trabalho:
Dissertação

Referência:
Lima, Laritza Ferreira de. Utilização do hormônio folículo estimulante (FSH) homeopático no cultivo in vitro de folículos pré-antrais ovinos inclusos em fragmentos de tecido ovariano. 2011. 120 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2011) - Universidade Estadual do Ceará, , 2011. Disponível em: Acesso em: 19 de junho de 2024

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