Influencia das Gonadotrofinas Fsh e Lh sobre o Desenvolvimento In Vitro de Foliculos Pre-Antrais Cap
Autor(es):
Saraiva, Márcia Viviane Alves
Palavras Chaves:
Não informado
Ano de Publicação:
2011
Resumo:
RESUMO0 objetivo deste trabalho foi quantificar os níveis de RNAm para os receptores de FSH (FSHR) em ovários caprinos, e verificar o efeito do FSH sozinho ou em associação ao LH, na presença ou ausência de EGF, sobre o cultivo in vitro de folículos pré-antrais (FOPA) caprinos isolados. Para tanto, na primeira fase, folículos ovarianos pré-antrais e antrais foram isolados mecanicamente para análise da expressão de RNAm para FSHR por RT-PCR em tempo real. Para a segunda fase, folículos secundários foram isolados para utilização em cultivo in vitro em três experimentos distintos. Para o experimento I, o cultivo folicular foi realizado em meio a-MEM+ suplementado com FSH em concentrações fixas (100 e 1000 ng/mL) ou crescentes (meio sequencial 1: FSH 100 ng/mL - D0-D6, FSH 500 ng/mL - D6-D12 e FSH 1000 ng/mL - D12-D18 ou meio sequencial 2: FSH 500 ng/mL - D0-D9 e 1000 ng/mL - D9-D18). No experimento II, o melhor meio de base obtido no experimento anterior (sequencial 1) foi utilizado como controle e a partir do D12 este meio foi suplementado com LH 50 ou 100 ng/mL. A RT-PCR foi utilizada para avaliar o efeito do FSH sobre os níveis de RNAm para os FSHR (experimento 1) e LHR (experimento 2) após o cultivo. No terceiro experimento, o meio de base foi semelhante ao anterior (sequencial 1 - Tl), e os demais tratamentos consistiram da adição de LH (50 e lOOng/ml) e/ou EGF (50 e lOOng/ml) a partir do D12 de cultivo. Os folículos foram avaliados quanto à viabilidade, formação de antro e aumento do diâmetro folicular, e aqueles que apresentaram diâmetro oocitário > 110 um foram destinados à maturação in vitro. No experimento I, observou-se que a expressão de FSHR aumentou quando os folículos passaram da fase pré-antral para antral. Após 18 dias, o meio sequencial 1 promoveu a sobrevivência e a formação de antro, e os meios sequenciais 1 e 2 aumentaram as taxas de retomada da meiose. No experimento 2 observou-se que o FSH estimulou a expressão de RNAm para LHR. A adição de LH em ambas as concentrações aumentou as taxas de crescimento folicular e a retomada da meiose em relação ao controle. No tocante ao experimento 3 a adição do EGF (em ambas as concentrações) ao LH 50 e a adição do LH 100 ao EGF 100 aumentaram a taxa de crescimento folicular diário. Os oócitos crescidos em folículos cultivados com EGF 100 em associação ao LH em ambas as concentrações tiveram um percentual de retomada da meiose superior aos demais tratamentos, sendo que o LH100/EGF100 possibilitou a obtenção de dois embriões. Em conclusão, a utilização de concentrações crescentes de FSH teve um impacto significativo no desenvolvimento de FOPA caprinos. A adição de LH melhorou o crescimento folicular e a retomada da meiose, e a suplementação do meio de cultivo com LH e EGF otimizou o crescimento folicular e possibilitou a obtenção de embriões caprinos a partir de FOPA crescidos e maturados in vitro.Palavras chave: Folículos pré-antrais, meio sequencial, FSH, LH, EGF.
Abstract:
Não informado
Tipo do Trabalho:
TCC
Referência:
Saraiva, Márcia Viviane Alves. Influencia das Gonadotrofinas Fsh e Lh sobre o Desenvolvimento In Vitro de Foliculos Pre-Antrais Cap. 2011. Sem Numeração Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em 2011) – Universidade Estadual do Ceará, , 2011. Disponível em: Acesso em: 3 de maio de 2024
Esse
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