Caracterização do sêmem de tambaqui Clossoma macropomum (Curvier, 1818) e criopreservação em diluentes à base de água de coco em pó (ACP-104)
Autor(es):
Vieira, Marcelo José da Ascensão Feitosa
Palavras Chaves:
Não informado
Ano de Publicação:
2010
Resumo:
A presente tese teve por objetivo avaliar as características espermáticas do sêmen de
tambaqui, com (I) e sem indução (NI) hormonal, por um período de doze meses, elaborar a
curva de concentração de espermatozóides de tambaqui através de câmara de Neubauer e
espectrofotômetro, assim como analisar as características cinéticas de sêmen de Tambaqui, C.
macropomum (Curvier, 1818), criopreservado em criosoluções a base de ACP 104®
ou
solução de Ringer, através da análise de sêmen auxiliado por computador (CASA). Foram
utilizados 26 machos com idade média de três anos, pertencentes ao Centro de Pesquisas em
Aqüicultura (CPAq) do Departamento Nacional de Obras Contra às Secas (DNOCS),
devidamente identificados com chips magnéticos. A análise através do (CASA) foi usada para
avaliar os efeitos da criopreservação na motilidade dos espermatozóides do tambaqui, diluído
em água de coco em pó (ACP-104) e em Ringer modificado para peixes, com dois
crioprotetores DMSO e Metilglicol, na concentração de 10%, em três diluições de sêmen (1:3,
1:4 e 1:5) para cada solução contendo diluidor e crioprotetor. Foram avaliados os percentuais
de espermatozóides móveis e estáticos, bem como os parâmetros de motilidade espermática e
velocidades curvilinear (VCL), velocidade em linha reta (VSL), velocidade média (VAP) e
linearidade (LIN), nos diferentes meios e diluições, descongelados 15 dias após
congelamento. Encontrou-se os seguintes dados seminais para o sêmen coletado do grupo I e
NI, nessa ordem: volume médio de 5,05 mL e 0,55 mL (p<0,05); pH médio de 8,21 e 8,09 (p>
0,05); osmolaridade média de 320,51 e 323 mOsm/Kg (p> 0,05) e concentração espermática
média de 22,93 x 109
e 40,46 x 109 sptz/mL (p<0,05). A produção espermática total foi de
115,79 x 109 sptz/mL no grupo I sendo de 22,25 x 109
sptz/mL no grupo NI. A concentração
espermática individual variou de 11,40 a 71,13x109 espermatozóides/mL. A avaliação da
concentração espermática, por espectrofotometria (λ=540nm) mostrou variação de
transmitância de 95% a 62,1%, além de uma forte correlação negativa, entre a concentração
ix
espermática em câmara de Neubauer e a transmitância a 540 nm. A mensuração da
concentração gerou equação Y= 100,293 - 0,509X; R2 = 0,966, (p<0,0001) SAS 2003, e se
mostrou eficiente, podendo ser empregada em procedimentos de rotina em laboratório de
reprodução artificial de peixes. Os resultados obtidos com o diluente à base de água de coco
em pó (ACP-104) se mostraram superiores em relação ao meio Ringer em relação à
quantidade de espermatozóides móveis, (45,63%±3,58 e 30,64%±2,67, respectivamente,
p<0,05) e quando se comparou os dois diluidores com os crioprotetores DMSO
(dimetilsufóxido) e metilglicol, o ACP-104 também mostrou resultados superiores aos obtidos
com a solução de Ringer (56,18%±5,29 e 34,52%±3,49, respectivamente, (p<0,05). Diante do
exposto conclui-se que a indução hormonal se faz necessária para facilitar a manipulação
seminal no tambaqui, não alterando as características do sêmen do mesmo. A determinação da
concentração espermática através da espectrofotometria (λ= 540nm) nesta espécie é eficiente.
Os resultados encontrados nesse estudo mostraram a superioridade do ACP-104®
como meio
diluente para criopreservação do sêmen do tambaqui, sendo, portanto, indicado para a
criopreservação nesta espécie.
Palavras chaves: Peixe. Tambaqui. CASA. Criopreservação. Água de coco em pó. ACP.
Abstract:
The present thesis had the objective to evaluate the spermatic characteristics of tambaqui, C.
macropomum (Curvier, 1818) semen with (I) and without (NI) hormonal induction, by a
period of twelve months, formulate the concentration curve of tambaqui sperm by Neubauer
chamber and spectrophotometer, as well as analyze the kinetic characteristics of tambaqui
semen cryopreserved in extenders based on ACP 104® or Ringer solution, through the sperm
analysis assisted by computer (CASA). In this work were utilized 26 males with an average
age of three years, belonging to Research Center in Aquaculture (CPAq) of the National
Department of Works Against the Droughts (DNOCS) and identified by magnetic chips. The
CASA system analysis was used to evaluate the cryopreservation effects on sperm motility
diluted in powder coconut water (ACP-104 ) solution and Ringer solution modified for fish,
associated with two cryoprotectors Dimethyl sulfoxide (DMSO) and Methyl glycol, in
concentrations of 10%, and three dilutions rates semen: extender (1:3, 1:4 and 1:5). The
analysis evaluated the percentage of motile spermatozoa, as well as the velocity parameters as
curvilinear velocity (VCL), straight line velocity (VSL), average path velocity (VAP) and
linearity (LIN), in the different dilutions medium and thawed 15 days after storage. The
results showed the following average seminal characteristics in the groups I and NI in that
order: volume of 5.05 mL and 0.55 mL (p<0,05); pH of 8,21 and 8,09 (p> 0,05); osmolarity
of 320.51 and 323 mOsm/kg (p> 0.05) and spermatic concentration of 22.93 x 109
and 40.46
x 109
sptz/ml (p<0,05). The total spermatic production was 115.79 x 109
sptz/ml in the I
group and 22.25 x 109
sptz/mL in the group NI. The individual sperm concentration varied of
11.40 to 71,13x109
spermatozoa/ml. The sperm concentration analysis by spectrophotometer
(λ=540nm) showed transmittance in the range of 95% to 62,1%. A strong negative correlation
was observed between the spermatic concentration in Neubauer chamber and transmittance in
540 nm. The measurement of sperm concentration generated the equation Y=100,293 -
xi
0,509X; R2
= 0.966, (p<0,0001) SAS 2003. The results obtained with extenders based on
powdered coconut milk (ACP-104) were higher than Ringer solution in relation to motile
spermatozoa quantity (45,63%±3,58 and 30,64%±2,67), respectively, (p<0,05) and when
compared the two diluents with the cryoprotectors DMSO (dimetilsufóxido) and metilglicol,
the ACP-104 also showed results higher than obtained with Ringer solution (56,18%±5,29
and 34,52%±3,49, respectively, p<0,05). This work concluded that the hormonal induction is
necessary to facilitate the manipulation the tambaqui semen. Moreover, the hormonal
induction didn't alter the seminal characteristics. The determination of spermatic
concentration through spectrophotometer (λ = 540nm) is an efficient and rapid method being
able to be employed in procedures of routine in laboratory of artificial reproduction of fish.
The superiority of the ACP-104® as diluent for cryopreservation of tambaqui sperm in this
study suggest the ACP104 can be routinely used in the cryopreservation semen of this specie.
Key Words: Fish. Tambaqui. CASA. Cryopreservation. Powder coconut water. ACP.
Tipo do Trabalho:
Tese
Referência:
Vieira, Marcelo José da Ascensão Feitosa. Caracterização do sêmem de tambaqui Clossoma macropomum (Curvier, 1818) e criopreservação em diluentes à base de água de coco em pó (ACP-104). 2010. 114 f. Tese (Doutorado em 2010) - Universidade Estadual do Ceará, , 2010. Disponível em: Acesso em: 4 de maio de 2024
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