Efeito de diferentes concentrações de oxigênio sobre o cultivo in vitro de folículos pré-antrais caprinos
Autor(es):
Silva, Cleidson Manoel Gomes da
Palavras Chaves:
Não informado
Ano de Publicação:
2009
Resumo:
O presente estudo visou avaliar o efeito de duas concentrações de oxigênio (O2) sobre a
sobrevivência e o desenvolvimento de folículos pré-antrais caprinos cultivados in vitro.
Folículos ovarianos pré-antrais (≥ 150 µm) foram isolados a partir de fragmentos do córtex
ovariano e individualmente cultivados por 30 dias sob duas diferentes concentrações de O2 (5
e 20%). O desenvolvimento folicular foi avaliado com base na formação da cavidade antral,
aumento do diâmetro folicular, presença do complexo cumulus-oócito viável e oócitos ≥ 110
µm. A viabilidade dos folículos classificados como vivos durante a avaliação morfológica foi
confirmada utilizando-se marcadores fluorescentes. Oócitos e células da granulosa foram
considerados viáveis quando apresentavam o citoplasma marcado positivamente com
calceína-AM (verde) e a cromatina não- marcada com etídio homodímero-1 (vermelho). Os
dados de sobrevivência, formação de antro e retomada da meiose após o cultivo in vitro foram
comparados pelo teste Qui-quadrado. O diâmetro folicular e taxa de crescimento após o
cultivo foram avaliados utilizando-se o teste não-paramétrico Kruskal-Wallis. Os resultados
mostraram que com a progressão do período de cultivo do dia 6 para o dia 12, houve uma
diminuição na sobrevivência folicular em ambas as concentrações de O2 (P<0,05). Quando as
concentrações de O2 foram comparadas em cada um dos diferentes dias de cultivo, a de 20%
foi mais eficiente na promoção do aumento do diâmetro folicular a partir do dia 24 de cultivo
quando comparado com a de 5% de O2 (P<0.05). Por outro lado, folículos cultivados na
presença de 5% de O2 tiveram um aumento na percentagem de formação de antro a partir do
dia 12 até final do cultivo, quando comparado com a concentração de 20% de O2 (P<0.05).
Contudo, não foram verificadas diferenças significativas na percentagem de oócitos crescidos
entre as diferentes concentrações de O2 testadas. No entanto, é importante enfatizar que 16,7%
dos oócitos oriundos de folículos cultivados na presença de 20% de O2 retomaram a meiose.
Em conclusão, a concentração de 20% de O2 foi mais eficiente na promoção do crescimento
folicular e retomada da meiose de oócitos obtidos de folículos pré-antrais de cabras crescidos
in vitro.
Palavras-Chave: Caprino. Oxigênio. Folículos Pré-Antrais. Cultivo.
Abstract:
The aim of the present study was to evaluate the effect of two different oxygen (O2)
concentrations on the survival and development of goat preantral follicles cultured in vitro.
Preantral ovarian follicles (≥ 150 µm) were isolated from ovarian cortex fragments and
individually cultured for 30 days under two different O2 concentrations (5% and 20%).
Follicle development was evaluated on the basis of antral cavity formation, increase in
follicular diameter, presence of healthy cumulus oocyte complexes and fully grown oocytes.
Viability of follicles classified as live through the morphological evaluation was confirmed
using fluorescent markers. Oocytes and granulosa cells were considered live if the cytoplasm
was stained positively with calcein-AM (green) and if chromatin was not labeled with
ethidium homodimer-1 (red). Data from follicular survival, antrum formation and meiotic
resumption after in vitro culture were compared by the Chi-square test. Follicular diameter
and growth rate after culture were compared by use of the Kruskal-Wallis non-parametric test.
Results showed that with progression of culture period from 6 to 12 days, a decrease in
follicular survival was observed in both O2 concentrations (P<0.05). When the O2 tensions
were compared to each other in the different days of culture, 20% O2 was more efficient in
promoting an increase in follicular diameter from day 24 of culture onwards than 5% O2
(P<0.05). However, follicles cultured with 5% O2 had an increased percentage of antrum
formation from day 12 to the end of culture, as compared with 20% O2 (P<0.05). Moreover,
there were no differences in the percentage of fully developed oocytes with the different O2
tensions. It is important to emphasize that16.7% of oocytes from follicles cultured in 20% O2
resumed meiosis. In conclusion, the concentration of 20% O2 was more efficient in promoting
follicular growth and oocyte meiosis resumption from preantral follicles of goats when grown
in vitro.
Keywords: Goat. Oxygen. Preantral Follicles. Culture.
Tipo do Trabalho:
Dissertação
Referência:
Silva, Cleidson Manoel Gomes da. Efeito de diferentes concentrações de oxigênio sobre o cultivo in vitro de folículos pré-antrais caprinos. 2009. 75 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2009) - Universidade Estadual do Ceará, , 2009. Disponível em: Acesso em: 29 de abril de 2024
Universidade Estadual do Ceará - UECE | Departamento de Tecnologia da Informação e Comunicação - DETIC
Política de Privacidade e Segurança Build 1
