Produção de embriões pró-nucleares em fêmeas doadoras das raças Canindé e Saanen durante um programa de transgênese caprina
Autor(es):
Moura, Raylene Ramos
Palavras Chaves:
Não informado
Ano de Publicação:
2008
Resumo:
A produção eficiente e a qualidade dos embriões pró-nucleares são fundamentais para o sucesso de um programa de transgênese caprina. Assim, este trabalho teve por objetivo comparar a produção quanti-qualitativa de embriões pró-nucleares em duas raças caprinas para posterior microinjeção de DNA. Para tanto, foram utilizadas fêmeas das raças Saanen (n = 12) e Canindé (n = 12), as quais tiveram o estro sincronizado pelo uso de esponjas vaginais por 10 dias e dcloprostenol no oitavo dia. Neste momento, as cabras receberam 120 mg (Canindé) ou 200 mg (Saanen) de NIH-FSH-P1, intervaladas de 12 h por três dias. As fêmeas também receberam 100 μg de GnRH às 36 h após a retirada da esponja e foram cobertas às 36 e 48 h após o final do tratamento progestágeno. A colheita embrionária foi realizada por lavagem do oviduto. Os embriões pró-nucleares foram microinjetados com uma construção de DNA contendo o gene hGCSF e a qualidade da microinjeção foi avaliada subjetivamente. Além disso, foram mensurados em cada embrião o diâmetro total, espessura da zona pelúcida, diâmetro do citoplasma e diâmetro dos pró-núcleos. A taxa de ovulação foi maior (P < 0,05) na raça Saanen (24,5 ± 11,7) que na raça Canindé (11,8 ± 7,0). Foi verificada uma menor porcentagem (P < 0,05) de estruturas fecundadas na raça Saanen (36,2%) em relação à raça Canindé (89,9%). A raça Canindé também produziu um maior porcentual (P < 0,05) de embriões pró-nucleares: 72,5% vs. 20,6%. A microinjeção de DNA foi considerada boa em 96,7% e 73,3% nos embriões Canindé e Saanen, respectivamente (P < 0,05). Diferenças significativas (P < 0,05) foram observadas para todos os parâmetros embrionários mensurados, com exceção do diâmetro do citoplasma. Desta forma, doadoras da raça Canindé foram mais eficientes que aquelas da raça Saanen no que se refere à produção de embriões pró-nucleares. Palavras-chave: Caprino. Embrião pró-nuclear. Microinjeção de DNA. Transgênese. Raça naturalizada.
Abstract:
The efficient production and quality of the pronuclear embryos are fundamental for the success of transgenesis programme. Thus, this work aimed to compare in two goats breed for embryo yield to be used for DNA microinjection. For this, Canindé (n = 12) and Saanen (n = 12) goat were heat- ynchronized using vaginal sponges for 10 days and cloprostenol on the eighth day. In this moment, donors received 120 mg (Canindé) or 200 mg (Saanen) of NIH-FSH-P1 given twice daily in decreasing doses over three days. All goats received an injection of GnRH at 36 h after sponge removal and they were hand-mated at 36 and 48 h after sponge removal. Embryo recovery was performed by oviduct flushing. Embryos were microinjected with a DNA construct containing the hG-CSF gene and the quality of microinjection was subjectively evaluated. The following parameters were measured for each embryo: total diameter, cytoplasm diameter, zona pellucida thickness and pronuclei diameter. The ovulation rate was higher (P < 0.05) in Saanen (24.5 ± 11.7) than Canindé (11.8 ± 7.0) breed. It was observed a lower (P < 0.05) percentage of fertilized ova in Saanen (36.2%) than Canindé (89.9%). Also Canindé donors produced a higher percentage (P < 0.05) of pronuclear embryos when compared to Saanen: 72.5% vs 20.6%, respectively. The microinjection was evaluated as good in 96.7% and 73.3% of times in Canindé and Saanen embryos, respectively (P < 0.05). Significant differences (P < 0.05) were observed for all morphometric parameters except for cytoplasm diameter. In conclusion, Canindé donors were more efficient than Saanen in yield of pronuclear-stage embryos. Keywords: Goat. Pronuclear embryo. DNA microinjection. Transgenesis. Local breed.
Tipo do Trabalho:
Dissertação
Referência:
Moura, Raylene Ramos. Produção de embriões pró-nucleares em fêmeas doadoras das raças Canindé e Saanen durante um programa de transgênese caprina. 2008. 68 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2008) - Universidade Estadual do Ceará, , 2008. Disponível em: Acesso em: 11 de maio de 2024
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