Avaliação do sêmen ovino diluído e congelado em meio à base de água de coco em pó (ACP-102c) ou tris
Autor(es):
Cavalcante, José Maurício Maciel
Palavras Chaves:
Não informado
Ano de Publicação:
2008
Resumo:
A inseminação artificial com uso do sêmen criopreservado é uma ferramenta valiosa em programas de melhoramento genético e conservação de raças ovinas. No intuito de facilitar a disponibilidade de diluidores seminais e reduzir seus custos, foi desenvolvido o diluidor de origem vegetal à base de água de coco em pó (ACP-102), que tem apresentado resultados satisfatórios na conservação do sêmen ovino resfriado. Há, no entanto, carência de estudos do uso deste diluidor na criopreservação do sêmen ovino. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência do sêmen ovino criopreservado nos diluidores ACP-102c e TRIS sobre a motilidade espermática e na morfometria da cabeça de espermatozóides em sistema de análise de sêmen auxiliada por computador (CASA). Foram realizadas 12 coletas de sêmen de quatro ovinos da raça Santa Inês. As amostras de sêmen de cada ejaculado foram divididas em duas alíquotas e diluídas em ACP-102c e TRIS e criopreservadas. O sêmen foi avaliado logo após descongelamento (T0), após uma hora (T1) e duas horas (T2) de incubação, para percentual de espermatozóides morfologicamente normais e de células vivas (pela técnica de coloração com eosina-nigrosina), avaliação da integridade acrossomal e de viabilidade celular (com uso da técnica de coloração tripla) e análise de motilidade em sistema CASA. Foram ainda realizados esfregaços tanto para o sêmen fresco como congelado em ACP-102c e TRIS, corados com Rosa Bengala e submetidos à análise morfométrica no módulo de morfometria do sistema CASA. Foram avaliados 150 espermatozóides corretamente digitalizados por lâmina para os parâmetros comprimento, largura, área e perímetro da cabeça. Não foram encontradas diferenças estatísticas entre o sêmen criopreservado nos diluidores ACP-102c e TRIS nos parâmetros adotados em cada técnica de coloração. Foram observadas diferenças estatísticas logo após descongelamento entre os diluidores ACP-102c e TRIS para motilidade total, motilidade progressiva e amplitude lateral da cabeça, com valores superiores encontrados no diluidor TRIS, mas ambos diluidores foram equivalentes quanto aos parâmetros qualitativos (retilinearidade e linearidade) e quantitativos (velocidade curvilinear e velocidade média do percurso), bem como freqüência de batimento cruzado do flagelo. Após duas horas de incubação, ambos diluidores diferiram significativamente para os parâmetros de motilidade avaliados, exceto para o parâmetro linearidade O diluidor ACP-102c apresentou maior variabilidade individual entre reprodutores. Os parâmetros morfométricos para o sêmen fresco foram significantemente superiores aos do sêmen criopreservado, não sendo detectadas diferenças estatísticas para espermatozóides criopreservados em ACP-102c ou TRIS. Os parâmetros morfométricos, entretanto, sofreram variações individuais entre os animais estudados. A semelhança dos resultados morfométricos de espermatozóides diluídos em ACP- 102c e TRIS é indicativo de que ambos possuem similar capacidade de preservação estrutural da cabeça de espermatozóides ovinos submetidos à criopreservação. Recomenda-se a pesquisa de novos protocolos de criopreservação que otimizem os resultados obtidos na criopreservação de sêmen ovino com o uso do ACP-102c, da interação entre constituintes do plasma seminal e de membrana dos espermatozóides com componentes do diluidor e a avaliação do sêmen ovino criopreservado em ACP-102c em programas de inseminação artificial. Palavras-chave: ACP-102c. CASA. Criopreservação. Motilidade, Morfometria. Sêmen ovino.
Abstract:
The cryopreservated semen at artificial insemination programs is a value tool for genetic and ovine breed conservation programs. To facilitate the disponibility of seminal extenders and reduce the costs, it was developed a vegetal extender based on powder coconut water (PCW- 102), that shown satisfactory results in chilled ram semen. However, there is a lack of studies using this extender in ram semen cryopreservation. The aim of this study were to evaluate the efficiency of ram semen cryopreserved on PCW-102c and TRIS on sperm motility and sperm head morphometry using computer assited semen analysis (CASA). Twelve semen collections were taken from four Santa Ines rams. Semen samples of each ejaculate was divided into two aliquots and extended on PCW-102c and TRIS and cryopreserved. The semen was evaluated at the moment of thawing (T0), after one hour (T1) and two hours (T2) of incubation, for percentage of spermatozoa morphologically normal and alive cells (by eosin-nigrosin dyeing technique), evaluation of acrosomal integrity and cellular viability (by triple stain technique) and motility evaluation at CASA system. Fresh and frozen-thawed semen were smeared and stained in Bengal Rose dye and analyzed using the morphometric module of CASA system. At least 150 properly digitized sperm head per slide were analyzed for length, width, area and perimeter. It weren’t observed statistical differences between semen cryopreserved on PCW- 102c and TRIS extenders for the parameters adopted in each stain technique. There are significant differences at the moment of thawing between PCW-102c and TRIS extenders for total motility, progressive motility and head lateral amplitude, with superior values for TRIS extender, but both extenders was equivalent for qualitative (straightness and linearity) and quantitative parameters (curvilinear velocity and average velocity), and frequency of track crossing. After two hours of incubation, both extenders were significantly different for motility parameters evaluated, except for linearity. The PCW-102c extender shows more individual variability between rams. The morphometric parameters for fresh semen were statistically superior to those of frozen-thawed semen, not being observed statistical differences for spermatozoa cryopreserved on PCW-102c or TRIS. The morphometric parameters, however, suffered individual variations between the animals studied. The similarity of morphometric resulties of spermatozoa extended on PCW-102c and TRIS indicate that both have similar capacity of preserve the head structure of ram spermatozoa cryopreservated. It was recommended the research of new cryopreservation protocols that optimize the results obtained on the ram semen cryopreservation with the use of PCW-102c, the interaction of seminal constituents and spermatozoa membrane with the extenders components and the evaluation of ram semen cryopreserved on PCW-102c at artificial insemination programs. Keywords: PCW-102c. CASA. Cryopreservation. Motility. Morphometry. Ram Semen.
Tipo do Trabalho:
Dissertação
Referência:
Cavalcante, José Maurício Maciel. Avaliação do sêmen ovino diluído e congelado em meio à base de água de coco em pó (ACP-102c) ou tris. 2008. 89 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2008) - Universidade Estadual do Ceará, , 2008. Disponível em: Acesso em: 28 de abril de 2024
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