Perfusão do dimetilsulfóxido em tecido ovariano ovino
Autor(es):
Pinto, Leonardo Correia
Palavras Chaves:
Não informado
Ano de Publicação:
2008
Resumo:
Este trabalho teve como objetivos determinar a quantidade de dimetilsulfóxido (DMSO) que penetra no tecido ovariano ovino após a exposição em diferentes tempos e concentrações, bem como verificar a viabilidade dos folículos pré-antrais inclusos em tecido ovariano após teste de toxicidade e criopreservação. Para mensurar a taxa de perfusão do DMSO foi utilizada a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Para avaliar a viabilidade folicular, após teste de toxicidade e criopreservação, o tecido ovariano foi criopreservado por congelação lenta e, após descongelação do tecido ovariano e isolamento folicular, os folículos pré-antrais foram analisados por azul de trypan. Para a análise estatística do efeito da concentração e do tempo de exposição sobre os folículos pré-antrais, foi utilizada ANOVA seguida de teste t. Os dados referentes à viabilidade folicular (testes de toxicidade e criopreservação) foram submetidos ao teste de Qui-quadrado, sendo os valores considerados significativos quando P < 0,05. Através da CLAE foi observado que o tempo de exposição não exerceu influência nos níveis teciduais do DMSO. Entretanto, após exposição por 30 minutos os fragmentos ovarianos expostos à solução DMSO 2,0 M retiveram níveis desse crioprotetor significativamente superiores à solução DMSO 1,0 M. Após criopreservação foi observada redução do percentual de folículos viáveis em todos os tratamentos quando comparados ao controle ou tecido não criopreservado. No entanto, pode-se concluir que apenas com 5 minutos (nas concentrações de 1,5 M, e 2,0 M) e 10 minutos de exposição (na concentração de 1,0 M) os níveis teciduais obtidos já foram suficientes para conferir proteção ao tecido durante a congelação, desta forma não sendo necessários tempos de exposições superiores. Palavras-chaves: Criopreservação, Perfusão, Dimetilsulfóxido, Tecido ovariano, Ovino
Abstract:
This study had as objectives to determine the amount of dimethyl sulfoxide (DMSO) that penetrates in the ovine ovarian tissue after the exposure in different times and concentrations, as well as to verify the viability of the included preantral follicles in ovarian tissue after toxicity test and cryopreservation. To measure the perfusion rate of DMSO High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) it was used. To evaluate the viability follicular after toxicity test and cryopreservation the ovarian tissue it was cryopreserved for slow freezing and the preantral follicles were analyzed by trypan blue. For the analysis the effect of the concentration and of the exposure time, was used ANOVA following by test t. The data about the viability follicular after the toxicity tests and cryopreservation were submitted to of Chisquare test, the values were considered statistically significantwhen P < 0.05. Through HPLC it was observed that of exposure time not exercise influence on tissue levels of DMSO. However, after exposure for 30 minutes the ovarian fragments exposed to the solution DMSO 2,0M kept tissue levels of that cryoprotectant significantly higher to the solution DMSO 1,0 M. After cryopreservation reduction of the percentage of viable follicles was observed in all of the treatments when compared to the control. However, it can be ended that now with 5 minutes (in the concentrations of 1,5 M, and 2,0 M) and 10 minutes of exposure (in the concentration of 1,0 M) the tissue levels obtained were already sufficient to check protection to the tissue during the freezing, this way not being required of better exposure times.
Pinto, Leonardo Correia. Perfusão do dimetilsulfóxido em tecido ovariano ovino. 2008. 66 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2008) - Universidade Estadual do Ceará, , 2008. Disponível em: Acesso em: 4 de maio de 2024
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