Criopreservação de sêmen canino com um diluidor à base de água de coco na forma de pó (ACP-106®): efeito da temperatura de adição do glicerol e da adição de antibiótico
Autor(es):
Barbosa, Claudia da Cunha
Palavras Chaves:
Não informado
Ano de Publicação:
2007
Resumo:
Pesquisas têm sido desenvolvidas objetivando aperfeiçoar os protocolos já existentes para a congelação de sêmen canino. Desta forma, este trabalho foi dividido em dois experimentos, tendo como objetivos: 1) comparar o efeito da temperatura de adição do glicerol (27 e 4°C) sobre o sêmen canino diluído em ACP-106® e criopreservado; 2) avaliar o efeito da adição de benzilpenicilina benzatina em diferentes concentrações sobre a qualidade espermática, e o controle do crescimento bacteriano no sêmen canino criopreservado em ACP-106®. Foram utilizados ejaculados caninos coletados por manipulação digital, os quais foram divididos e destinados aos devidos tratamentos. Para o primeiro experimento, foram formados dois grupos, sendo um o G27 (que foi glicerolizado à temperatura de 27°C) e o G4 (que foi glicerolizado a 4°C). Para o segundo, foram formados quatro grupos: G0 (diluído sem antibiótico); G500 (com 500 UI/mL); G1.000 (com 1.000 UI/mL); e G1.500 (com 1.500 UI/mL). Cada experimento foi submetido a um processamento de criopreservação, sendo o sêmen de uma maneira geral diluído, resfriado, glicerolizado (para todos os grupos do segundo experimento e o grupo G4 do primeiro experimento), envasado, congelado e armazenado em nitrogênio líquido. Após uma semana, as amostras foram descongeladas e submetidas a avaliações espermáticas e microbiológicas (experimento 2). Os ejaculados a fresco apresentaram-se dentro dos padrões requeridos para espécie, possibilitando assim sua utilização para os experimentos. No experimento 1, após a descongelação nenhuma diferença foi observada entre as temperaturas de adição do glicerol com relação aos parâmetros de motilidade avaliados pelo CASA, morfologia, integridade de acrossoma, percentual de espermatozóides vivos e teste hipoosmótico. No experimento 2, nenhuma diferença foi observada entre os grupos após descongelação com relação ao percentual de espermatozóides vivos e morfologicamente normais, e com membrana espermática fucional, com exceção do G1.500 que apresentou um aumento no número de acrossomas danificados aos 60 minutos. Na avaliação computadorizada, também não foi evidenciada diferença entre os grupos para todos os parâmetros avaliados. Não foi observada diferença entre os grupos para ao número de UFC/μL após a descongelação. Concluiu-se que temperatura de adição do glicerol não influencia a qualidade pós-descongelação do sêmen canino diluído em ACP-106® e que a benzilpenicilina benzatina quando adicionada ao ACP-106® não controla o crescimento bacteriano, e não influencia a qualidade espermática após a criopreservação do sêmen canino. De uma maneira geral, verificou-se que o processamento do sêmen canino utilizando o diluidor ACP-106® , ficou mais prático, sendo possível a realização de uma única diluição à temperatura ambiente. No entanto, ainda há necessidade de novos estudos para se verificar a ação de outros antibióticos, bem como suas interações para o controle do crescimento bacteriano, bem como seus efeitos sobre o espermatozóide canino criopreservado em ACP- 106®. Palavras-chave: sêmen; cão; ACP-106®; glicerol; antibiótico.
Abstract:
Researches have been developed aiming to improve the already existing protocols for canine semen freezing. In this way, this work was divided in two experiments, aiming: 1) to compare the effect of glycerol addition at two temperatures (27 and 4°C) on canine semen extended and frozen with powdered coconut water extender (ACP-106®); 2) to analyze the effect of benzylpenicillin benzatin addition in different concentrations on semen quality, and on control of bacterial growth on canine semen cryopreserved in ACP-106®. Canine ejaculates were collected by digital manipulation, which were divided and destined to different treatments. For the first experiment, two groups were formed, which one was G27 (that received glycerol at 27°C) and the G4 (that received glycerol an 4°C). For the second, four groups were formed: G0 (without antibiotic); G500 (extended with 500UI/mL); G1.000 (extended with 1.000UI/mL); and G1.500 (extended with 1.500UI/mL). Each experiment was submitted to one cryopreservation process, which, in generally, the semen was extended, cooled, extended with glycerol (for all groups of the second experiment and G4 of the first one), packed, frozen and stored in liquid nitrogen. After about one week, samples were thawed and submitted to spermatic and microbiology evaluations (experiment 2). Fresh ejaculates were in conformer to the pattern of canine specie, being possible to be employed for the experiments. In experiment 1, after thawing, no differences were observed between temperatures of glycerol addiction on regarding seminal motility analyzed by CASA, morphology, acrossomal integrity, hypo-osmotic swelling and alive spermatozoa. In experiment 2, no differences were observed between groups after thawing regarding the percentage of alive spermatozoa and morphological normal spermatozoa, and with functional membrane, excepted in G1.500 that presented increase on damaged acrossoma number on 60 minutes. In computerized analyzes, it was also not evidenced differences between groups for all seminal parameters. The same was observed rega rding the number of UFC/μL after thawing. In conclusion, the glycerol temperature addition does not influence the quality of post-thawed canine semen diluted in ACP-106® and that benzylpenicillin benzatin when added to ACP-106® do not control bacterial growth and does not influence spermatic quality after canine semen cryopreservation. In general, it was observed that canine semen processed with ACP-106® extender become more practical, being possible to perform only one dilution at room temperature. Further more, it is still necessary to conduct new studies to verify the action of others antibiotics and theirs interactions for controlling bacterial growth, and their effects on canine spermatozoa cryopreserved in ACP-106®. Keywords: semen; dog; ACP-106®; glycerol; antibiotic.
Tipo do Trabalho:
Dissertação
Referência:
Barbosa, Claudia da Cunha. Criopreservação de sêmen canino com um diluidor à base de água de coco na forma de pó (ACP-106®): efeito da temperatura de adição do glicerol e da adição de antibiótico. 2007. 67 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2007) - Universidade Estadual do Ceará, , 2007. Disponível em: Acesso em: 5 de maio de 2024
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