Efeito da micotoxina Zearalenona associada ou não com o metabólito Enterolactona no cultivo in vitro de tecido ovariano ovino
Autor(es):
Silva, Izabel Pessoa Da
Palavras Chaves:
Cultivo in vitro; Micoestrogênio; Fitoestrogênio; Desenvolvimento folicular; Expressão gênica
Ano de Publicação:
2021
Resumo:
Os grãos produzidos na agricultura fazem parte da alimentação de humanos e animais, podendo conter fitoestrógenos, bem como contaminantes como as micotoxinas. Dentre os fitoestrogenos e as micotoxinas estrogênicas, destacam-se as lignanas e seu metabólito, a enterolactona (ENL) e a zearalenona (ZEN), respectivamente. Essas substâncias apresentam atividades estrogênicas e podem ter efeitos sobre a reprodução, não devendo negligenciar seus efeitos isolados e em associação sobre a fisiologia reprodutiva. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da ENL e da ZEN isoladamente ou em associação sobre a sobrevivência e a morfologia de folículos pré-antrais ovino inclusos em fragmentos ovarianos cultivados in vitro, bem como a expressão gênica e o estresse oxidativo. Ovários de 10 ovelhas foram coletados em abatedouro local e fragmentados. Os fragmentos selecionados foram distribuídos e cultivados in vitro por 3 dias a 38 °C, 5% CO2, nos seguintes tratamentos: 1- controle fresco, 2- controle cultivado, 3- ZEN (1 µmol/L), 4- ENL (1 µmol/L), 5- ZEN (1 µmol/L) + ENL (1 µmol/L). Após o cultivo in vitro, fragmentos ovarianos de todos os tratamentos foram submetidos às análises histológicas e à expressão relativa do mRNA para ABCG2, ERP29, BAX e BCL2. Os meios de cultivo foram analisados separadamente para estresse oxidativo (nitrito e malonaldeído) e níveis de estradiol. Os resultados mostraram que o cultivo in vitro reduziu as porcentagens de folículos primordiais, primários e secundários morfologicamente normais quando comparados ao controle não cultivado, exceto para folículos secundários cultivados na presença de ENL (P < 0,05). Além disso, o cultivo in vitro aumentou a densidade dos folículos primários, principalmente quando o meio de cultivo foi suplementado com ENL (P < 0,05). A adição de ENL isoladamente ou em associação com ZEN aumentou a expressão do RNAm de ABCG2 (P < 0,05). A presença dos xenoestrogênios no meio de cultivo aumentou a expressão relativa para BAX (P < 0,05). Quando comparado ao controle apenas ZEN induziu aumento na expressão de BCL2 (P < 0,05). Em conclusão, a ENL neutralizou com sucesso os efeitos deletérios da ZEN sobre a sobrevivência de folículos primordiais e primários. Entretanto a adição de ENL isoladamente não afetou a sobrevivência de folículos primordiais e primários, porém melhorou a sobrevivência de folículos secundários.
Abstract:
Grains produced in agriculture are part of the diet of humans and animals and may contain phytoestrogens, as well as contaminants such as mycotoxins. Among phytoestrogens and estrogenic mycotoxins, lignans and their metabolite enterolactone (ENL) and zearalenone (ZEN) stand out, respectively. These substances have estrogenic activities and may have effects on reproduction, and their isolated and associated effects on reproductive physiology should not be neglected. Therefore, the aim of this study was to evaluate the effect of enterolactone (ENL) and zearalenone (ZEN), alone or in combination, in the in vitro culture of preantral follicles enclosed in sheep ovarian tissue fragments on the survival and morphology, as well gene expression and oxidative stress. Ovaries from 10 sheep were collected at a local abattoir and fragmented. The fragments selected were distributed and cultured in vitro for 3 days at 38 °C, 5% CO2, in the following treatments: 1- fresh control, 2- cultured control, 3- ZEN (1 µmol/L), 4- ENL (1 µmol/L), 5- ZEN (1 µmol/L) + ENL (1 µmol/L). After in vitro culture, ovarian fragments of all treatments were submitted to histological analysis and the relative mRNA expression for ABCG2, ERP29, BAX, and BCL2. The culture media were separately analysed for oxidative stress (nitrite and malondialdehyde) and estradiol levels. The results showed that the in vitro culture decreased the percentages of morphologically normal primordial, primary and secondary follicles when compared to the non-cultured control, except for secondary follicles cultured in the presence of ENL (P < 0.05). Moreover, in vitro culture increased the density of primary follicles, especially when the culture medium was supplemented with ENL (P < 0.05). Addition of ENL alone or in association with ZEN increased ABCG2 mRNA expression (P < 0.05). The presence of xenoestrogens in the culture medium increased the relative expression of BAX (P < 0.05). When compared to the control, only ZEN induced an increase in BCL2 expression (P < 0.05). In conclusion, ENL successfully neutralized the deleterious effects of ZEN on the survival of primordial and primary follicles. However, the addition of ENL alone did not affect the survival of primordial and primary follicles, but it improved the survival of secondary follicles.
Tipo do Trabalho:
Dissertação
Referência:
Silva, Izabel Pessoa Da. Efeito da micotoxina Zearalenona associada ou não com o metabólito Enterolactona no cultivo in vitro de tecido ovariano ovino. 2021. 69 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico ou Profissional em 2021) - Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza, 2021. Disponível em: Acesso em: 1 de abril de 2025
Universidade Estadual do Ceará - UECE | Departamento de Tecnologia da Informação e Comunicação - DETIC
Política de Privacidade e Segurança Build 1
